紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)作原理結(jié)構(gòu)與能
作原理
分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后，發(fā)生了電子能躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn)，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團(tuán)的信息。可以用標(biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段行定性分析。
根據(jù)Lambert-Beer定律說(shuō)明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說(shuō)明光的吸收與溶液濃度成正比；如果同時(shí)考慮吸收層厚度和溶液濃度對(duì)光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對(duì)溶液行定量分析。
結(jié)構(gòu)與能
由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)顯示系統(tǒng)五大分組成。
光源：是提供符合要求的入射光的裝置，有熱輻射光源和氣體放電光源兩類(lèi)。熱輻射光源用于可見(jiàn)光區(qū)，般為鎢燈和鹵鎢燈，波長(zhǎng)范圍是350~1000nm；氣體放電光源用于紫外光區(qū)，般為氫燈和氘燈，連續(xù)波長(zhǎng)范圍是180~360nm。
單色器：能是將光源產(chǎn)生的復(fù)合光分解為單色光和分出所需的單色光束，它是分光光度計(jì)的心臟分。
吸收池：又稱(chēng)比色皿，供盛放試液行吸光度測(cè)量之用，其底及兩側(cè)為毛玻璃，另兩面為光學(xué)透光面，為減少光的反射損失，吸收池的光學(xué)面須垂直于光束方向。根據(jù)材質(zhì)可分為玻璃池和石英池兩種，前者用于可見(jiàn)光光區(qū)測(cè)定，后者用于紫外光區(qū)。
檢測(cè)器：是將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置，測(cè)量吸光度時(shí)，并非直接測(cè)量透過(guò)吸收池的光強(qiáng)度，而是將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換為電流信號(hào)行測(cè)試，這種光電轉(zhuǎn)換器件稱(chēng)為檢測(cè)器。